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甘蔗莖尖脫毒組培苗保綠實驗的研究

?? 作者:zhuobo?? 發布時間:2021-03-08 15:15:03?? 瀏覽次數:1

返回:公司新聞

  甘蔗是無性繁殖作物,常規育種利用種莖繁殖,繁殖系數低,用種量大。應用植物組織培養技術可以大大提高甘蔗的繁殖系數。對加速繁殖甘蔗良種,具有重要的意義。而甘蔗莖尖脫毒組培苗在繁殖過程中受影響的因素很多,其中生根階段又是甘蔗組培苗繁殖生長的最后一關,生根質量的好壞直接影響甘蔗組培苗的假根成活率,也就影響到甘蔗良種的繁殖數量,因此,本文主要探討幾種重要物質對甘蔗生根效果的影響,另外對甘蔗的保綠質量的好壞,對甘蔗的良種繁殖也有很重要的影響:延長種苗種植時間;提高種苗成活率;使其生命力增強;抗逆性增高,著手探討其對甘蔗組培苗保綠效果的影響。結果發現:其對甘蔗組培苗確實有保綠效果。

  1 . 材料與方法

  1.1 參考材料:云蔗99-601

  1.2 甘蔗莖尖脫毒組培苗生根實驗

  取生長整齊,均勻,繼代數一致,每瓶苗數一致的云蔗99-601莖尖脫毒苗在MS培養基中進行生根實驗。方案如下:

  ①:不同NAA濃度對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響,共設6個濃度,分別為0,1,1.5,2,3,3.5,mg/L,每濃度30瓶。

  ②:不同的IAA對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響,共設6個濃度分別為0,0.5,2,3,4,5,mg/L,每濃度30瓶。

  ③:不同的濃度的硅對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根及保綠的影響,共設11個濃度,分別為0,0.05,0.1,0.2,0.3,0.5,1,1.5,1.8,2.3,3mg/L,每濃度30瓶。

  ④:NAA和硅配合對云蔗99-601生根和NAA和保綠的實驗,共設6個濃度分別為:0,0.3,0.5,1,1.5,2mg/L的硅,各加上MS+NAA2mg/L,每濃度30瓶。

  ⑤:沙床種植試驗:取上述1.2中各濃度的NAA,IAA,硅的組培甘蔗苗,各取10瓶進行沙床種植。每對照2行,共42行。

  2 . 結果分析

  2.1.1.不同NAA濃度對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響列在表1。

  表1.接種33天后不同NAA濃度對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根

  


  從表1可以看出:NAA濃度不同,其對甘蔗莖尖組培苗生根的影響也不同,以2mg/L的NAA對云蔗99-601的生根影響效果最好。

  2.1.2.不同濃度的IAA對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響列在表2

  從表2可以看出IAA對甘蔗生根有一定的影響,隨著IAA濃度的增加,甘蔗的生根效果越來越好,到2mg/L時生根最好:根濃而密,較粗壯;苗墨綠;黃葉基本沒有。以后隨著IAA濃度的增加,甘蔗的生根效果越來越差。

  2.1.3.不同濃度〔1-3mg/L〕的硅在不同時間對云蔗99-601生根的影響列在表3

  表2不同濃度的IAA對云蔗99-601莖尖脫毒苗生根的影響

  


  表3不同濃度〔1-3mg/L〕的硅在不同時間對云蔗99-601生根的影響

  


  從表3可知:30天之內,各濃度的硅促進生根的差別不明顯,但較長時間(如40天),各濃度的硅促進生根的差別較明顯,以1mg/L的促進生根的效果最好。

  另外,在各時間段,不同濃度的低濃度硅〔濃度分別為0,0.05,0.1,0.2,0.3,0.5mg/L 〕對云蔗99-601生根差別也不明顯。生根率都在40%-60%之間,其中以0.5mg/L的促進生根相對較好,達到59%。

  比較硅和NAA的甘蔗苗,發現各濃度的硅都對甘蔗苗的保綠效果明顯,明顯高于各濃度NAA的培養基的甘蔗苗,在培養基中加入硅的甘蔗苗明顯地黃花少,長勢好,而其中只加入NAA的明顯地黃花多,長勢弱,差別非常明顯。其中以加入0.4-0.5mg/L的硅保綠效果最好;比較各濃度的IAA和NAA甘蔗苗,發現IAA仍有部分的保綠效果,但沒硅明顯。

  


  


  左為IAA,由左至右的濃度分別為:0.52345mg/L,右為NAA由左至右的濃度分別為:11.5233.5 mg/L

  2.1.4.NAA和硅配合對甘蔗生根及保綠的影響試驗:

  按保綠來看:接種80后天以MS+ Si0.5mg/L的效果最好,苗綠少,明顯地苗壯,與其它濃度對照差異非常明顯;

  


  按生根情況來看,以MS+NAA 2mg/L+Si1mg/L的生根最好,具體情況如下表

  表4:.NAA和硅配合對甘蔗生根的影響

  


  2.1.5.各濃度的NAA,IAA,硅培養的云蔗99-601莖尖脫毒苗組培,組培苗的沙床種植試驗,由NAA 3.5,3,2,1.5,1.0,mg/L各取10瓶,IAA 5,4.3,2,0.5,mg/L各10瓶。硅3,2.3,1.8,1.5,1,0.5,0.4,0.3,0.2,0.05,mg/L各取10瓶,沙床種植,每種對照種兩行,共42行,沙床種植30天后,統計結果如下:

  從長勢方面看:培養基中加硅0.2-3mg/L甘蔗苗的長勢明顯高于加人IAA和NAA的,培養基中加NAA的長勢最差,加IAA的次之,加硅的最好。但培養基中加NAA 3mg/L和NAA 2mg/L的甘蔗苗明顯莖粗。在所有沙床種植甘蔗苗中,以MS培養基(不加其它物質)長勢最差,苗細而弱,倒伏多,死亡率高,以加NAA3mg/L的莖最粗,培養基中加NAA 3mg/L,和NAA 2mg/L的沙床種植甘蔗苗長勢不明顯,在培養基中加硅0.4,0.5,1,1.8,2.3mg/L的沙床種植甘蔗苗的長勢差別不明顯,其中以培養基中加入硅1mg/L 和硅1.5mg/L的株莖最高,長勢也最好,在MS培養基中加入IAA 的長勢僅次于硅,MS中加入IAA 3mg/L和IAA 2mg/L的變化不明顯,但它們如和加IAA 4mg/L和IAA 5mg/L的相比變化卻很明顯。長勢明顯高于后者。

  


  3 .小結與討論

  目前,甘蔗的良種繁殖除了采用常規的種莖繁殖以外,就是采用組織培養生物技術進行良種快繁,組織培養生物技術繁殖速度快,能保持良種的種性,可以克服常規的種莖繁殖率低的缺點,而且還可以生產出無病蟲害的健康種苗。在甘蔗組織培養的整個過程中,甘蔗組培苗沙床生根階段的生根質量的好壞,和種苗的保綠狀況,直接影響到甘蔗組培苗假植成活率。本文主要探討NAA,IAA,Si對甘蔗組培苗的生根,以及沙床種植后甘蔗苗長勢的影響,也對硅的促進生根及保綠作用作了一些探討。較高濃度(﹥0.0001mg/L)的NAA能促進生根,在MS培養基中加入2 mg/L的NAA對云蔗99-601的生根效果最好;低濃度(﹤50mg/L)的IAA具有降低木質素,增加纖維素含量的作用,對甘蔗的莖尖脫毒苗的生根有一定的效果,并且,它對甘蔗的保綠也有一定作用,但它在促進生根方面不如NAA;在保綠方面不如硅;研究中還發現:6-BA可有效地誘導芽的萌發,對甘蔗莖尖脫毒組培苗的生根有抑制作用,因凡是MS中加入6-BA的,都沒有生根,而對照組(MS培養基)部分生根,生根率44%;硅對甘蔗莖尖脫毒組培苗的生根有促進作用,以1mg/L的效果最好。雖效果稍遜于NAA,但它能使葉綠體,基粒片層增大增多,使線粒體數增多,對組培苗的保綠有較好的效果 ,關于硅對甘蔗保綠的影響,是本實驗的一個亮點,國內外還沒有類似的報道;在2 mg/L NAA和各濃度的硅的配合實驗時,也是以0.5 mg/L的硅保綠效果最好;因NAA可使根活力下降,所以沙床種植時苗的長勢并不很好。

  因此,甘蔗莖尖脫毒組培苗在生根和繁殖過程中,要嚴格按照以上的要求進行,才有利于提高組培苗的成活率。


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